杂交瘤细胞制备示意图如下。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。据图回答下列问题:
(1)细胞融合的原理是_____________,诱导动物细胞融合特有的方法是__________________________。
(2)选择免疫B细胞是因为其_____________,且使杂交瘤细胞能在HAT培养液中生存。杂交瘤细胞制备利用了骨髓瘤细胞的_____________特点。杂交瘤细胞具备两种细胞的优势。
(3)利用杂交瘤细胞生产_____________抗体,还需要进一步的多次筛选,原因是_____________。
(4)将最终获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到_____________内增殖,一段时间后从相应的材料中获取抗体。
高三生物综合题中等难度题
杂交瘤细胞制备示意图如下。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。据图回答下列问题:
(1)细胞融合的原理是_____________,诱导动物细胞融合特有的方法是__________________________。
(2)选择免疫B细胞是因为其_____________,且使杂交瘤细胞能在HAT培养液中生存。杂交瘤细胞制备利用了骨髓瘤细胞的_____________特点。杂交瘤细胞具备两种细胞的优势。
(3)利用杂交瘤细胞生产_____________抗体,还需要进一步的多次筛选,原因是_____________。
(4)将最终获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到_____________内增殖,一段时间后从相应的材料中获取抗体。
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骨髓瘤细胞由于缺乏X酶,在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长;而B淋巴细胞能产生X酶。某科研小组制备单克隆抗体的步骤如下:
①给小鼠注射特定抗原,一段时间后获取B淋巴细胞;
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合后,诱导细胞融合;
③将融合后的细胞在HAT筛选培养液中培养,获得杂交瘤细胞;
④进行第二次筛选;
⑤体外培养,获得单克隆抗体。
回答下列问题:
(1)单克隆抗体最主要的优点是____________________________。给小鼠注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌______________的B淋巴细胞。
(2)上述诱导细胞融合时,与诱导植物细胞融合不同的方法是使用______________处理。细胞融合依据的原理是细胞膜具有______________。
(3)利用HAT培养液筛选杂交瘤细胞的原理是:①骨髓瘤细胞之间两两融合后,由于_____________而无法生长;②B淋巴细胞之间两两融合后,由于_____________而无法生长;③杂交瘤细胞由于_________________,因而能生长。
(4)第二次筛选要获得的是_____________的细胞。
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利用细胞工程技术制备抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体,其主要流程如下。请回答下列问题:
①取免疫后的B淋巴细
胞与骨髓瘤细胞融合②用HAT选择培养
基筛选出杂交瘤细胞③将杂交瘤细胞接种到多孔细胞培
养板上,筛选出抗体检测阳性细胞④体外培养获得抗
HCG单克隆抗体
(1)制备抗HCG单克隆抗体过程中,用到的动物细胞工程技术有______和______。
(2)细胞DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。在HAT培养基中加入了氨基嘌呤,杂交瘤细胞能连续增殖,未融合细胞以及同种融合细胞因不能增殖而死亡。由此可判断,骨髓瘤细胞DNA合成存在______(填“D”“S”或“D和S”)途径,杂交瘤细胞存在____途径。
(3)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测,该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL,再在每个培养孔中滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的是___。
(4)用抗HCG单克隆抗体作为诊断试剂,能在妊娠初期即可作出诊断,主要是因为该抗体具有____的优点。
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下图是单克隆抗体制备流程示意图。下列有关叙述正确的是
A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的T淋巴细胞
B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C.③同时具有脾脏细胞和骨髓瘤细胞的特性
D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
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下面为制备单克隆抗体过程示意图,相关叙述错误的是
A.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞
B.②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质
C.上图中有一处明显错误
D.⑤可以无限增殖
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运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是 ( )
①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ⑥大量培养杂交瘤细胞 ⑦诱导细胞融合 ⑧单克隆抗体的大量制备
A.②④③⑦⑤①⑥⑧ B.②③④⑦①⑤⑥⑧
C.④③⑦②⑤①⑧⑥ D.③④⑦①⑤⑧⑥②
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运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是
①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原
③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞
⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ⑥大量培养杂交瘤细胞
⑦诱导细胞融合 ⑧单克隆抗体的大量制备.
A.②④③⑦⑤①⑥⑧ B.②③④⑦①⑤⑥⑧
C.④③⑦②⑤①⑧⑥ D.③④⑦①⑤⑧⑥②
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运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是( )
①筛选杂交瘤细胞
②制备特异性抗原
③免疫动物
④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞
⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞
⑥大量培养杂交瘤细胞
⑦诱导细胞融合
⑧单克隆抗体的大量制备.
A.②④③⑦⑤①⑥⑧
B.②③④⑦①⑤⑥⑧
C.④③⑦②⑤①⑧⑥
D.③④⑦①⑤⑧⑥②
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实验室利用细胞工程制备单克隆抗体。首先将抗原I注入小白鼠体内,几天后从小白鼠体内提取B淋巴细胞,并与小鼠骨髓瘤细胞融合,再对杂交瘤细胞进行两次筛选,获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。最后在细胞培养液中培养杂交瘤细胞,并从培养液中提取单克隆抗体。
(1)操作过程中,有两次筛选,这两次筛选的目的分别是:
①初次筛选获得融合的杂交瘤细胞的原因是。
②二次筛选目的是获得能产生人们需要的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(2)在适当的器皿中加入定量的合适的动物细胞培养液、温度适宜、定时充入氧气,并按时均匀震荡培养液,以防止其贴壁生长。从理论上讲,杂交瘤细胞具备生产所需的两个重要特点:①具有无限增殖能力,② 。
(3)如果前面的操作成功,将在培养液中提取到抗体,这样得到的抗体与传统方法得到的抗体的显著的区别是:。
(4)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入。同时,在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证。
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下列关于单克隆抗体制备的叙述中,正确的是( )
A.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞
B.筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定培养基再次筛选分泌单克隆抗体的细胞
C.人鼠杂交瘤细胞大规模培养时,细胞中染色体组数最多是4个
D.杂交瘤细胞大规模培养时,只有编码抗体的基因可以获得表达
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