DNA测序是生命科学常规技术，可用于人类基因组和其他许多动物、植物和微生物物种的完整DNA...

DNA测序是生命科学常规技术，可用于人类基因组和其他许多动物、植物和微生物物种的完整DNA序列的测定。链终止DNA测序法主要步骤是：先向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种脱氧核苷酸类似物，以得到各种不同长度的脱氧核苷酸链；再通过电泳呈带（按分子量大小排列），从而读出对应碱基的位置（如下图）。请分析回答：

（1）图中“加热变性”的过程实质是使_________断裂，人体细胞中完成该过程必需有____________的催化。

（2）生物体内DNA复制的特点_______________________________________________

（3）若用上述测序方法读出新链中碱基T的位置，则必须加入带标记的______________类似物。

（4）采用上述链终止法测定人类基因组DNA中的全部碱基排序，你认为至少要按图中所示模式操作________________次。

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基因检测是指通过检测生物体中的DNA序列，以了解生物体基因状况的技术手段。Sanger双脱氧链终止法是DNA测序的基本方法，其原理是:核酸模板在核酸聚合酶、带有3′-OH末端的单链核苷酸引物、四种dNTP存在的条件下复制或转录时，如果在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键），只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长，链端掺入dNTP的片段可继续延长。通过电泳将不同长度的片段分开，DNA片段越小，距离起点越远，根据末端核苷酸可得到原始序列信息。具体流程图如下。

（1）若待测核酸模板为双链DNA，首先要作____________处理，与引物结合后，在DNA聚合酶作用下子链沿____________方向（填“5′端向3′端”或“3′端向5′端”）进行延伸反应。若待测核酸模板为RNA，则需要在____________酶的帮助下合成DNA单链片段。

（2）ddNTP为2，3-双脱氧核苷三磷酸，只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长的原因是____________。

（3）假设某反应体系中，待测DNA单链序列3′GTACCGTA5′，加入4种dNTP和ddATP，经过双脱氧链终止法处理，会得到____________种片段，其中最短的片段序列是____________。

（4）假设某次Sanger双脱氧链终止法测序得到的电泳图如上图所示，则待测DNA序列从5′端到3′端为____________。

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（5分）基因工程实验中经常需要对未知DNA序列进行测序，英国科学家Sanger因发明了链终止DNA测序法而获诺贝尔奖。其主要内容步骤是：先向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种脱氧核苷酸类似物，以得到各种不同长度的脱氧核苷酸链；再通过电泳呈带（按分子量大小排列），从而读出对应碱基的位置（如下图）。请分析回答：

（1）若在活细胞内发生图中“加热变性”的结果，必需有________的参与。

（2）假设一条模板链中含N个胸腺嘧啶脱氧核苷酸，通过上述操作能得到________种长度不同的脱氧核苷酸链。

（3）所得到的各种长度不同的脱氧核苷酸链之所以能通过电泳而分离开来，主要是依据它们的差异。

（4）若用上述测序方法读出新链中碱基G的位置，则必须加入带标记的________类似物。

（5）采用上述链终止法测定某一双链DNA中的全部碱基排序，你认为至少要按图中所示模式操作________次。

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人类基因组计划的目标是测定人类的DNA中碱基的排列顺序。测序的方法有多种，其中双脱氧链终止DNA测序法是一种通过向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种带标记的脱氧核苷酸类似物，得到长度不同的脱氧核苷酸链，再通过电泳条带（按相对分子质量大小排列）读出对应碱基的位置的方法，操作方法如图所示。下列叙述错误的是（　　 ）

A.图示中加热的目的是破坏氢键，使DNA分子两条螺旋的双链解开

B.图示操作过程中加入的带标记的ddAMP是腺嘌呤脱氧核苷酸的类似物

C.为测出上图模板链中G的位置，应加入带标记的ddGMP

D.测定一段DNA分子中的全部碱基序列。最少要按图中所示模式操作3次

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下列关于人类遗传病和基因组测序的叙述，正确的是

A. 人类中患红绿色盲的女性多于男性

B. 人类基因组测序是测定人体细胞中所有DNA碱基序列

C. 产前诊断能有效地检测出胎儿是否患有遗传病

D. 不携带致病基因就不会患遗传病

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下列关于人类遗传病和基因组测序的叙述，正确的是

A.21三体综合征因为基因数目增加属于多基因遗传病

B.人类基因组测序是测定人体细胞中所有DNA碱基序列

C.遗传咨询第一步是分析并确定遗传病的遗传方式

D.不携带致病基因也会患遗传病

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在人类染色体DNA不表达的碱基对中，有一部分是串联重复的短序列，它们在个体之间具有显著的差异性，这种短序列可用于（　　 ）

A.基因测序 B.侦查罪犯 C.遗传病的产前诊断 D.基因治疗

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下列关于现代生物技术的叙述，不正确的是

A．科学家利用一些可以调节细胞渗透压的基因来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力

B．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，创造出了许多动物、植物的新物种

C．哺乳动物在自然条件下，配子的发生、受精和早期胚胎的发育规律是胚胎工程的理论基础

D．植物组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于细胞产物的工厂化生产

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双脱氧核苷酸常用于DNA测序，其结构与脱氧核苷酸相似，能遵循碱基互补配对原则参与DNA的合成。DNA合成时，若连接上的是双脱氧核苷酸，子链延伸终止；若连接上的是脱氧核苷酸，子链延伸继续。若有适量的序列为GTACATACATG的单链模板、腺嘌呤双脱氧核苷酸和4种脱氧核苷酸，则以该单链为模板合成出的不同长度的子链最多有

A．2种 　　　　　　 B．3种 　　　　　　　 C．4种 　　　　　　　　 D．5种

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．由于乙型肝炎病毒不能用动物细胞培养，因此无法用细胞培养的方法制造疫苗。自1979年对乙型肝炎病毒基因组的DNA测序完成后，得知病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列。下图是应用生物工程生产乙肝疫苗的示意图，据图分析下列叙述不正确的是    （    ）

A、生产乙肝疫苗的过程也达到了定向改造细菌的目的

B、用于生产疫苗的目的基因仅为编码核心蛋白的碱基序列

C、用于生产疫苗的目的基因可编码表面抗原蛋白

D、在②过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶

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