以下是基因工程四个主要操作程序：
①基因表达载体的构建 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的获取 ④目的基因的检测与鉴定
请回答下列问题：
（1）进行③操作时，可以从基因文库中获取，基因文库分为_____________ 两种，其区别是_____________ ，PCR扩增也是获取目的基因常用的方法，进行PCR时，需要向扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶、四种原料、_____________ 以及引物，合成引物的前提是_____________ 。PCR扩增时，与引物结合的是_____________ 。
（2）进行操作①时，应先选择合适的载体，常见的载体是质粒，质粒的本质是______；如图是常用的质粒载体，基因工程中利用BamH I限制酶识别CCATCC序列，并在GG之间切割，通过BamH I限制酶切割形成的末端属于___________，科研人员利用该质粒完成基因工程，则通过___________基因供重组DNA的鉴定与选择。
高三生物综合题中等难度题
以下是基因工程四个主要操作程序：
①基因表达载体的构建 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的获取 ④目的基因的检测与鉴定
请回答下列问题：
（1）进行③操作时，可以从基因文库中获取，基因文库分为_____________ 两种，其区别是_____________ ，PCR扩增也是获取目的基因常用的方法，进行PCR时，需要向扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶、四种原料、_____________ 以及引物，合成引物的前提是_____________ 。PCR扩增时，与引物结合的是_____________ 。
（2）进行操作①时，应先选择合适的载体，常见的载体是质粒，质粒的本质是______；如图是常用的质粒载体，基因工程中利用BamH I限制酶识别CCATCC序列，并在GG之间切割，通过BamH I限制酶切割形成的末端属于___________，科研人员利用该质粒完成基因工程，则通过___________基因供重组DNA的鉴定与选择。
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以下是基因工程四个主要操作步骤：①基因表达载体的构建；②将目的基因导入受体细胞；③目的基因的获取；④目的基因的检测与鉴定。请分析回答相关问题：
(1)基因工程操作的正确步骤是 ____（填数字）。
(2)进行③操作时，可以从基因文库中获取，基因文库分为基因组文库和______两种，其区别是______；PCR扩增也是获取目的基因常用的方法，进行PCR时，需要向扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶、四种原料、_____以及引物，合成引物的前提是____。
(3)进行操作①时，应先选择合适的载体，常见的载体是质粒，质粒的本质是_______；右图是常用的pBR322质粒载体，该质粒含有抗氨苄西林基因(Ampt)和抗四环素基因(Tetr)，两个抗性基因中均具有限制酶酶切位点。若用限制酶Psl I切割并构建好表达载体，后将构建好的表达载体导入受体菌中，若受体菌_____，则说明目的基因插入到了pBR322载体中。若受体菌____，则说明目的基因没有插入到pBR322载体中。
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在基因工程的基本操作程序中，会发生碱基互补配对现象的是
A. 利用反转录法获取目的基因 B. 基因表达载体的构建
C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测与鉴定
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基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，包括以下几个环节：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。回答下列相关问题：
（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即____________和从生物材料中分离。如果利用某植物为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两者相比cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的__________（多/少）。
（2）在构建基因表达载体时，经常使用质粒载体作为基因工程的工具，其应具备的基本条件有__________（答出两点即可）。除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。启动子是__________酶识别并结合的部位。这一步骤中通常还会利用到DNA连接酶，常见的有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是__________。
（3）将目的基因导入受体细胞时，如果受体为植物细胞，采用最多的方法是__________，如果受体为动物细胞，采用最多的方法是__________。
（4）最后，要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，经常采用的检测方法是_______________。
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基因工程操作的核心步骤是
A. 获取目的基因 B. 构建基因表达载体
C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测和鉴定
高三生物单选题简单题查看答案及解析
在基因工程的操作步骤中，未发生碱基互补配对的是 （ ）
A．目的基因的获取 B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定
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正确表示基因操作“四步曲”的是： （ ）
①获取目的基因； ②目的基因导入受体细胞；
③基因表达载体的构建； ④目的基因的检测和鉴定
A．①②③④ B．④①③② C．①③②④ D．③①②④
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【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
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下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到工具酶。常用的DNA连接酶有__________和___________，后者也可以用于平末端的连接。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与__________、标记基因和终止子等组件重组在一起，载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于 _________。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用___________刺激供体雌性鼠超数排卵，然后从______________冲取______________，再完成体外受精。
（3）将目的基因导入细胞：确定目的基因是否整合到染色体上，一般需用______________做探针，与转基因小鼠细胞中提取的______________进行DNA分子杂交。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加___________、______________，氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行_____________处理。移植后，还要对受体雌鼠进行_____________检查。
（6）胚胎干细胞形态上具有__________________________________________的特性，它在添加______________的培养液中可以维持不分化的状态。
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请回答关于生物工程操作和应用的优势的有关问题：
（1）基因工程中，不能将目的基因直接导入受体细胞，而是先要构建基因表达载体，因为其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以_____________________________ ，同时，使目的基因能够_____________。
（2）植物细胞工程中，微型繁殖技术不仅可以保持_____________________________，还可以高效快速实现种苗的大量繁殖。同时由于培养细胞一直处于不断地分生状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而产生____________，从中筛选出对人们有力的个体。
（3）动物细胞核移植技术选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是：去核卵母细胞的细胞质中含有__________________的物质，并且营养物质丰富，有利于早期胚胎的发育。
（4）“生物导弹”是借助单克隆抗体的___________作用，在原位杀死癌细胞，减少毒副作用。
（5）进行胚胎移植的优势是可以充分发挥________________________________。
（6）ES细胞可以用于治疗人类的某些顽症，因为ES细胞在功能上具有____________特性。
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