【生物——选修1：生物技术实践】欲从土壤中筛选出能产生脲酶的微生物并予以纯化计数，采用了下...

【生物——选修1：生物技术实践】欲从土壤中筛选出能产生脲酶的微生物并予以纯化计数，采用了下图所示的基本操作流程，请回答下列问题：

（1）取得土样后应先用　　　　 （填试剂）对土壤进行梯度稀释，然后将稀释涂布在平面培养基上，这种选择培养基在营养组成上的重要特点是　　　　 。在这样的培养基上长出的细菌　　　　 （填“一定”或“不一定”）都能产生脲酶。若在平板中加入酚红，目的菌落出现的变化是　　　　　 。

（2）若要对相应微生物进行计数，一个稀释度应涂布2到3个平板，并计算　　 。若稀释不够高，所得的数据与实际值比较应　　　　　 （填“偏大”“偏小”或“相等”）。经涂布获得的菌落可以采用平板划线法进一步纯化，每次划线后接种环必须　　　　 ，才能再次用于划线。获得的纯化菌种可以保存在试管中，塞上棉塞或盖上封口膜，不能密封，原因是　　　　　　　 。

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【生物一选修1生物技术实践】

传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从油脂污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。

（1）在菌株筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上；随后对培养基采用高压蒸汽灭菌，目的是__________________。

（2）为了筛选出目的菌株，可将适量的_________(试剂）滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后若菌落周围出现________________，则说明此菌株能够降解脂肪。

（3）把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，需利用_____________法进行接种，注意每次操作前均要___________；操作时首尾区______________。

（4）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为_________________；实验结束后，使用过的培养基应该进行____________处理后才能倒掉。

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【生物—选修I:生物技术实践】下图是分离、纯化及保存枯草芽抱杆菌菌株的过程示意图:将土壤表层土稀释液煮沸巧分钟(枯草芽抱杆菌的芽抱不会失去活性)静置5分钟后获得样品，进行如下操作:

请回答下列问题:

(1)可知，除用选择培养基外，还有__________起到筛选作用。

(2)上图的划线操作中，培养基从物质状态分类上属于_______，接种环用____法进行灭菌，划线过程中第一区和最后一区的划线_______________(能/不能)相连。

(3)用稀释涂布平板法在5个培养基平板上，均接种稀释倍数为104的样品液0.1ml,培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为13. 160, 532, 175和187。每毫升样品中的细菌数量为

_______________个。

(4)用上述方法统计出的菌落数往往比样品中活菌的实际数目_____，原因是____。

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[生物——选修1:生物技术实践]请回答与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的有关问题。

(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、________、________和无机盐。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_____和___________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_______。

(3)可以通过____________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成____。

(4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则土壤细菌的增长呈现___型曲线增长。

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请分析回答下列有关生物技术实践的问题：

（1）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_____________和___________。通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________________和___________________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯____________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（2）下面是与植物芳香油的提取相关的问题，请回答：

①玫瑰精油的提取就可使用如图所示装置，这种方法叫_____蒸馏法；蒸馏时收集的蒸馏液____(是/不是)纯的玫瑰精油。

②胡萝卜素是_______色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是____法，采用_____加热；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成__比；经萃取过滤得到的液体是__________，之后还需上述装置进行浓缩处理，该装置所起作用是_______。

③将提取的胡萝卜素粗品通过_______法进行鉴定，如图为鉴定结果示意图，请据图回答。A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是______。甲代表的物质是______，乙代表的物质是_________________。

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【生物—选修模块1：生物技术实践】

请回答与微生物分离和培养有关的问题:

（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是___________（填序号）。为减少误差，在设置平板是一般要______或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0．2ml，则每克样品中的菌落数为_______________。

①土壤取样

②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液

③吸取0．1ml溶液进行涂布平板

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基和培养皿进行灭菌的常用方法分别是___________、__________；要求实验操作应在_____________进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（3）要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，而寻找耐热菌要从高温热泉中，这说明寻找目的菌的方法是：______________。

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【选修1：生物技术实践】

下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：

纯化发酵菌的方法步骤：配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。

（1）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是________________________________。

（2）微生物培养基的营养成分包括____________、水、无机盐和生长因子。

（3）某同学用新鲜苹果醋为实验材料分离纯化其中的发酵菌，为了保证能获得单菌落，要先对苹果醋____________________________________。

（4）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10－5、10－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是_____________，设置对照组的目的是_________________。

（5）上图所示曲线中，能正确表示上述发酵过程中培养液pH变化曲线是_________（选填“①”、

“②”、“③”、“④”）。

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[生物一选修1:生物技术实践]图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题：

（1）实验室获得纯净培养物的关键是　　　　　　　　　　 。

（2）图示流程的主要操作包括　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　 。

（3）—般选择菌落数在　　　　　　　　　 的平板进行计数，结果比较准确。

（4）当培养基中纤维素成为唯一碳源时，可筛选出　　　　　　　　 。要证明其有选择作用，可以用　　　　 作对照，比较菌落数目；还可以在培养基中加入刚果红染料，如果　　　　　　　　 ，也证明其选择作用。

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【生物-选修1：生物技术实践】

下图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程，回答下列问题：

（1）将土壤表层泥土稀释液煮沸15min后获得的样品中，仍然含有一些活的菌种，原因是_____________。

（2）图中将菌种接种到平板1的方法是_______；将菌种接种到平板2之前，接种工具常用_______法进行灭菌。为了逐步分离、纯化得到目的菌种，平板1和平板2中的培养类型都应该属于______培养基。对于使用频繁的菌种可接种到上图试管中的______培养基上临时保藏。

（3）用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190，据此推测，每mL样品液中的细菌数量为__________个。稀释涂布平板法能够通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数目，原因是_____________。

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[生物——选修1：生物技术实践] 生物界是个无穷宝库，人类从中获得了大量有用的物质。请回答下列有关问题。

（1）利用谷氨酸棒状杆菌生产食用味精。欲纯化谷氨酸棒状杆菌并计数，将菌液接种到固体培养基上的方法是___________。谷氨酸棒状杆菌的计数结果比实际值偏低，其原因是_______。

（2）动物血清中含白蛋白、球蛋白等多种蛋白质，从中依据相对分子质量大小分离出某种球蛋白最常用的方法是_______。

（3）辣椒素是辣椒中的辣味物质，可用于食品保健等领域。该物质不溶于水而易溶于有机溶剂，可以用______的方法提取，其提取效率主要取决于_______。

（4）植物芳香油天然珍贵，应用历史久远。提取玫瑰精油宜采用的方法是______，原因是玫瑰精油易挥发、难溶于水、化学性质稳定。在最后分离的油层中加入无水硫酸钠的目的是______，一般采用______法除去固体硫酸钠。

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