【生物——选修1:生物技术实践】硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物（如长石、云母）以及...

【生物——选修1:生物技术实践】硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物（如长石、云母）以及磷灰石等分解转化，释放出水溶性的钾、磷，将土壤中的无效磷钾转化为速效养分。现代工业可将硅酸盐细菌制成细菌肥料，达到增产目的。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基以及硅酸盐细菌培养基上均能生长，下表1是硅酸盐细菌m培养基的一种配方。答下列问题：

（1）根据硅酸盐细菌培养基的配方可知，从功能上看，该培养基属于　　　　 培养基，原因是　　　　　　 。

（2）培养硅酸盐细菌时必须进行无菌操作。培养基的灭菌一般采用　　　　　　　　 法。

（3）表2的名称是　　　　　　 ，在进行接种时，所有的操作都应在　　　　　　　　 附近进行。在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是　　　　　 　 。

（4）在进行表2所示实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中　　　　　　 ，说明培养基灭菌合格；根据表2数据可以得出，用　　　　　　 培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

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[生物—选修1：生物技术实践]硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物（如长石、云母）以及磷灰石等分解转化，释放出水溶性的钾、磷，将土壤中的无效磷钾转化为速效养分。现代工业可将硅酸盐细菌制成细菌肥料，达到增产目的。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基以及硅酸盐细菌培养基上均能生长，下表1是硅酸盐细菌培养基的一种配方。答下列问题：

（1）根据硅酸盐细菌培养基的配方可知，从功能上看，该培养基属于___________培养基，原因是________________。

（2）培养硅酸盐细菌时必须进行无菌操作。培养基的灭菌一般采用__________法。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是_______________。

（3）表2的名称是__________________，在进行接种时，所有的操作都应在_______________附近进行。在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是________________。

（4）在进行表2所示实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中___________，说明培养基灭菌合格；根据表2数据可以得出，用__________培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

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（生物——选修1：生物技术实践）

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为能被植物吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，科研人员进行了如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图2），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1：取某地区土样10g制得土壤溶液并进行一定浓度梯度的稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2：在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落的特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如下表）。

（1）步骤1采用的是____________法分离解磷菌株；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，图1中应选择____________倍稀释度的菌液计数，结果才准确可靠。据图可得出每克土样中解磷菌株的活菌数为____________。

（2）图2中，依次进行的划线的四个区域的面积要求为A＜B＜C＜D，D区面积最大的原因是____________，注意D区划线，不要与____________（填字母）区相连。

（3）为了筛选出所需菌株，培养基中唯一的磷源应该是____________________。培养基上出现的单一菌落可以看作一个____________（填“种群”“群落”或“生态系统”。）根据实验结果可以确定熔解磷能力最强的菌株是____________。

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[生物——选修1：生物技术实践]为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌，研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌（目的菌）。下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图，下表是分离纯化的结果。请回答下列问题：

（1）培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供 　　 　　　　　　 等营养要素。从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用　　 （填“固体”或“液体”）培养基。

（2）配制成10-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移人盛有___　　 _ mL无菌水的试管中，并依次配制10 -2～10 -10的梯度稀释液。

（3）在分离、纯化过程中，图中②、③过程接种的方法分别为____、　　 。在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是　　　　　　　　　　 。

（4）分析菌种的分离纯化结果，应选择为 　　 号菌落进行扩大生产，原因是　　　　　　　　 。

（5）实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是____。

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[生物——选修1:生物技术实践）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_____________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_____________和_____________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_______。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、_________和_______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_____________（1分）附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

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下面有关固氮微生物及氮循环的说法中，正确的一项是（    ）

A．生物固氮过程就是通过固氮微生物，把大气中的氮气转化为硝酸盐

B．在氧气不足的情况下，土壤中的一些细菌可以将硝酸盐转化为亚硝酸盐最终转化为氨气

C．根瘤菌同化作用类型为共生，圆褐固氮菌为自生

D．在配制培养圆褐固氮菌的培养基时不需加入有机氮但需加入糖

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【选修1：生物技术实践】有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以　　　　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于　　　　　　　　 培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即　　　　　　　　 和　　　　　　　　 。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力　　　　　　　　 。

（4）通常情况下，在微生物的培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　　 和　　　　　 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯　　　　　　　　 附近进行，以免周围环境中微生物的污染。

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[生物—选修模块1：生物技术实践]（15分）

Ⅰ．纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在　　　　　　 环境采集。

②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H20 1．2g、KH2PO40．9 g、MgSO4·7H2O 0．5g、KCl 0．5g、酵母膏0．5 g、水解酪素0．5g（蒸馏水定容到1000mL）。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是　　　　　 。

③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。

Ⅱ．回答下列与芳香油提取相关的问题：

（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有　　　　　　　 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，原因是　　　　　　　　 。

（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和　　　 　　　 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是　　　　　　　　 。

（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会　　　　 　　 。

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【生物—选修1：生物技术实践】泡菜的制作容易受环境条件的影响，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，均会造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。某研究小组以“测定泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化”为课题开展了如下研究。请分析回答：

①取3只泡菜坛，分别编号A、B、C。

②向3只泡菜坛内分别加入调味料和0.6Kg洗净的新鲜大白菜。

③向三只泡菜坛内分别加入2L浓度依次为10％、20％、30％的食盐水。

④密封后置于相同的环境中发酵。

⑤测定亚硝酸盐的含量。在封坛前进行第一次测定，以后定期测定，并将测定的数据绘制成曲线图如下。

(1)制作泡菜的主要菌种是________，其代谢类型是__________。

(2)该实验的自变量是________________。实验中食盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是________________________________。

(3)图中曲线1是________坛测定的结果，原因是_____________________。泡菜的口味是________________。

(4)为了使实验结果更准确，测定亚硝酸盐含量时应___________。制作泡菜效果最好的食盐水浓度为________。

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[生物——选修1:生物技术实践]已知硅酸盐细菌在甲（尿素为唯一氮源）、乙、丙培养基上均能生长。表1表示以尿素为唯一氮源的培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题：

表1

表2

（1）表1从物理性质看属于_______________培养基，按用途划分属于_______________培养基。

（2）为统计硅酸盐细菌的数目，应采用_______________法进行接种，该方法的所有操作都应在___________环境中进行。表2中，稀释度为_______________时，统计的结果较为可靠。

（3）为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是__________。由表2中的数据得出，用____________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

（4）甲培养基中加入___________指示剂，可根据指示剂变红的情况初步鉴定菌种分解尿素的情况。

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