（共10分）根据各类微生物形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微...

（共10分）根据各类微生物形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌和硝化细菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写有关内容。（注：圆褐固氮菌能自生固氮）

⑴用无氮培养基可筛选出___________________。

⑵用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_____________。

⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入______________。

⑷用加了较高浓度NaCl的选择培养基可筛选出金黄色葡萄球菌，或者根据菌落的颜色呈现_________色，将其挑取单独培养 。

⑸利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈________色并带有 ________的是____________，挑取该菌单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。

⑹在无氧条件下培养混合菌，___________________可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制___________的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长的菌落，即可分离出____________。

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（15分）生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养

请回答下列有关问题：

（1）将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是_________。

（2）在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有_______，常使用_______的方法从发酵液中提取纯酒精。

（3）从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在_______环境中采集土样，所选择的培养基应以_______作为唯一碳源。

（4）纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行_______处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和_______法。

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各种微生物在一定条件下形成的菌落特征(如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等)具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。菌落特征与微生物的菌体形态结构特征密切相关。固体培养基上的一个菌落与下列哪一项最相似? (    )

A．组织    B．器官    C．个体    D．种群

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通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出

①大肠杆菌　②霉菌　③放线菌　④固氮细菌

A．④②③　　 B．①②③　　　　 C．①③④　 　　 D．③④

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在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出（　　 ）

A. 固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

B. 固氮细菌、大肠杆菌、放线菌

C. 乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

D. 固氮细菌、霉菌、放线菌

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在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出 （　　　　 ）

A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌

C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌

D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

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下面是关于微生物的培养和研究的一些问题，请回答：

（1）观察这些微生物的菌落所用的培养基类型是________。培养基中不加入________可以选择培养自养型微生物。

（2）微生物接种最常用的方法有________。其中即可分离又可计数活菌的接种方法是________，原因是________。

（3）分离分解尿素的细菌时，培养基中需加入________指示剂。而分离分解纤维素的细菌时，在培养基中需加入________染料来筛选。

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分离分解纤维素的微生物的实验流程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选符合要求的菌落。请回答下列问题。

（1）土壤取样一般选择____________丰富的环境。进行选择培养的目的是____________。

（2）测定土壤中纤维素分解菌的数量，一般选用_________________倍的稀释液进行培养。

（3）将样品用____________________（填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”） 接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，具体操作都要在_____________________附近完成。

（4）刚果红可与纤维素形成________________复合物，因此纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的__________________，据此可以筛选纤维素分解菌。

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肺炎双球菌体外转化实验中，将热处理的S型菌进行分离提纯获得的物质分别与R型菌混合，接种到培养基上，观察到表面光滑的菌落。下列有关叙述正确的是

A. 可以通过菌落特征鉴别S型菌和R型菌

B. 提纯后的物质诱发R型菌发生了基因突变

C. 荚膜多糖进入R型菌导致表面光滑的菌落出现

D. R型菌转化成S型菌后DNA中嘌呤的比例发生了改变

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某兴趣小组用从不同环境中采集的土壤等进行了“分解纤维素的微生物的分离”实验，实验过程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落，实验结果见下表1：

表1　不同土壤微生物对纤维素的分解

（1）上述实验过程中“选择培养”的目的是________________。

（2）与30℃相比，37℃培养时霉菌类纤维素分解菌生长迅速，菌丝会________其他菌落，对后续菌种的分离造成困扰，因此采用30 ℃培养为佳。

（3）兴趣小组在鉴别菌种时尝试了两种方案：A． 先培养微生物，再加入刚果红染色；B． 直接在加入刚果红的鉴别培养基上培养微生物。结果发现：A方案在漂洗多余刚果红的过程中，易出现菌落浮起被带走的现象，从而造成________，故选方案B。由于刚果红在高温下容易被分解，应在培养基灭菌________（填“前”或“后”）加入。

（4）有小组成员根据表1结果中的________，认为菌料中的目的菌分解纤维素的能力最强，其他成员对此观点提出异议。兴趣小组继续对三组样品进行透明圈直径、菌落直径和酶活力的测定，实验结果如下表2：

表2　不同H/C值纤维素分解菌酶活性的比较

你认为将________作为判断纤维素分解菌分解能力大小的依据更合理，其大小与酶活力呈________相关。

（5）兴趣小组欲对培养液中的纤维素分解菌进行计数，具体做法是：先在培养基上加入若干质量较轻的小球，然后在平板上滴加一定体积的培养液，盖上培养皿盖后左右摇晃。试分析这样做的目的是________。

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