人的HPRT基因缺陷(HPRT-)细胞和小鼠的TK基因缺陷(TK-)细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体,但保留所有的鼠染色体。因此,利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
(1)将人的HPRT-细胞与小鼠的TK-细胞用________促进融合,然后培养在________培养基(HAT)中,最终筛选出人—鼠杂种细胞。
(2)将存活下来的杂种细胞进行________培养,获得不同的细胞株,用________染色后镜检,观察结果如下:
细胞株编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
所含人染色体编号 | 11,14, 17,22 | 7,11, 14,17 | 5, 7, 17,21 | 2, 9, 11,17 | 5,17, 18,20 | 2, 5, 17,19 |
由此可推测________基因在________染色体上。
(3)如果要确定人鸟苷酸(UMP)激酶基因所在染色体,应选择UMP激酶缺陷的________(填“人”或“鼠”)细胞与相应细胞杂交,这样的方法________(填“能”或“不能”)对小鼠的基因进行定位。
(4)经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的,结果可能导致( )
A.转录不能进行
B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列
D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变
高三生物综合题简单题
人的HPRT基因缺陷(HPRT-)细胞和小鼠的TK基因缺陷(TK-)细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体,但保留所有的鼠染色体。因此,利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
(1)将人的HPRT-细胞与小鼠的TK-细胞用________促进融合,然后培养在________培养基(HAT)中,最终筛选出人—鼠杂种细胞。
(2)将存活下来的杂种细胞进行________培养,获得不同的细胞株,用________染色后镜检,观察结果如下:
细胞株编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
所含人染色体编号 | 11,14, 17,22 | 7,11, 14,17 | 5, 7, 17,21 | 2, 9, 11,17 | 5,17, 18,20 | 2, 5, 17,19 |
由此可推测________基因在________染色体上。
(3)如果要确定人鸟苷酸(UMP)激酶基因所在染色体,应选择UMP激酶缺陷的________(填“人”或“鼠”)细胞与相应细胞杂交,这样的方法________(填“能”或“不能”)对小鼠的基因进行定位。
(4)经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的,结果可能导致( )
A.转录不能进行
B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列
D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变
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人的HPRT基因缺陷(HPRT-)细胞和小鼠的TK基因缺陷(TK-)细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体,但保留所有的鼠染色体。因此,利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
(1)将人的HPRT-细胞与小鼠的TK-细胞用________促进融合,然后培养在________培养基(HAT)中,最终筛选出人—鼠杂种细胞。
(2)将存活下来的杂种细胞进行________培养,获得不同的细胞株,用________染色后镜检,观察结果如下:
细胞株编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
所含人染色体编号 | 11,14, 17,22 | 7,11, 14,17 | 5, 7, 17,21 | 2, 9, 11,17 | 5,17, 18,20 | 2, 5, 17,19 |
由此可推测________基因在________染色体上。
(3)如果要确定人鸟苷酸(UMP)激酶基因所在染色体,应选择UMP激酶缺陷的________(填“人”或“鼠”)细胞与相应细胞杂交,这样的方法________(填“能”或“不能”)对小鼠的基因进行定位。
(4)经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的,结果可能导致( )
A.转录不能进行
B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列
D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变
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【(10分)下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答。
(1)图示技术名称为________ ,该技术的基础是___________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应在_____代以内;诱导融合运用了________原理,该过程中区别于原生质体融合的方法是用________处理。
(3)HAT培养基属于 ____培养基,其中需要加入________等天然物质。
(4)培养时PH一般为________ ;为操作中加入鸟本苷的目的是______。
(5)右表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码________酶的基因位于染色体2上。
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(10分)下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答。
(1)图示技术名称为________ ,该技术的基础是___________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应在_____代以内;诱导融合运用了________原理, 该过程中区别于原生质体融合的方法是用________处理,。
(3)HAT培养基属于 ____培养基,其中需要加入________等天然物质。
(4)培养时PH一般为________ ;为操作中加人鸟本苷的目的是______。
(5)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码________酶的基因位于染色体2上。
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将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合(只考虑细胞两两融合)后,在HAT培养基上,同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖。增殖过程中,细胞内人染色体随机丢失,只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如下表。下列叙述正确的是
A.在HAT培养基上,融合细胞均能存活和增殖
B.可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh
C.可以确定①②③的相关基因组成相同
D.可以将T(t)基因定位于人第17染色体
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20世纪70年代,科学家将人的次黄嘌呤磷酰核糖转移酶(HPRT)基因转移到HPRT基因缺陷的突变小鼠体内,使受体细胞表达出HPRT,该实验证明哺乳动物可以通过基因转移来改变遗传性状和生物学特性。请回答下列问题:
(1)将切下来的HPRT基因片段与载体连接时,可以使用两类“分子缝合针”,其中能“缝合”双链DNA平末端的是____________________。
(2)为使HPRT基因在受体细胞中能稳定存在并顺利表达,构建的基因表达载体中HPRT基因的上游和下游必须分别含有__________,同时,基因表达载体中还应有标记基因,其作用是__________。
(3)用小鼠细胞某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,则该受体菌群就是小鼠的__________。
(4)培育转基因小鼠时,通常采用__________(方法)将HPRT基因表达载体导入小鼠受精卵。现在,科学家通过实验发现:利用电激方法将外源DNA导入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)比之前的传统方法具有更多的优点。ES细胞在形态上表现为__________(至少答出两点)。在__________细胞上或添加抑制因子的培养液中,ES细胞能维持不分化的状态。
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Ⅰ、图一是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解。
图二表示将人的成纤维细胞与小鼠细胞进行融合,获得部分杂种细胞的过程(注:杂种细胞中人类的染色体会随机丢失,各种杂种细胞保留人类染色体的各类和数量是不同的)。表1表示杂种细胞中基因的存在与人体染色体的关系。请据图回答:
表1 杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系
杂种细胞系 | ||||||
A | B | C | D | E | ||
人体基因 | 1 | + | - | - | + | - |
2 | - | + | - | + | - | |
3 | + | - | - | + | - | |
人体染色体 | 1 | - | + | - | + | - |
2 | + | - | - | + | - | |
3 | - | - | - | + | + |
注:“+”表示有,“-”表示无。
(1)图一①、②所示的结构分别是_____________、__________________。
(2)图一③所示的生物工程技术是___________________,常用处于____________时期的卵母细胞作为受核细胞,图④所示技术利用的原理是_______________。除了图③、④所示的技术外,整个图示过程还应用了哪些胚胎工程技术?________________(写出两种)。
(3)图一过程③通常用去核卵母细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外,还因为____________________________________________________。
(4)图一过程④通常用②做受体细胞是因为_________________________________。过程④的完成需要用到的基因操作工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和________。
(5)图二中常用的与诱导植物原生质体融合不同的促融方法是_________________,若只考虑人的成纤维细胞与鼠细胞两两融合形成的杂种细胞,假如每种杂种细胞只保留了人的1条染色体,从染色体组成的角度考虑,杂种细胞可能有________种。
(6)据表1推测,位于第1染色体上的是基因_______,可进一步证明萨顿的假说——基因在染色体上。
Ⅱ、在进行林业工程建设时,一方面要号召农民种树,保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题,如粮食、烧柴以及收入等问题。其体现的生态工程的基本原理是___________________________。
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随着“人——鼠”杂种细胞的分裂,细胞中来自人的染色体会随机丢失,在最终稳定时,杂种细胞只保留了人的一条或几条染色体。利用此特性,可将某些基因定位于特定的染色体上。
I.将人小鼠细胞融合时,常用_______或聚乙二醇促进融合,细胞融合过程体现了细胞膜具有_____________。
II.基因T控制合成的酶能利用胸腺脱氧核苷、基因H控制合成的酶能利用次黄嘌呤。不能同时利用这两类物质的细胞不能成活。将基因型为ttHH人细胞悬液和基因型为TThh鼠细胞悬液混合,诱导细胞融合,后置于添加有胸腺脱氧核苷和次黄嘌呤的HAT培养基中。
(1)HAT培养基按功能分属于_____________。
(2)细胞的融合率很低,若细胞只能两两融合。在HAT培养基存活细胞的基因型为_____________,判断依据是_____________。
(3)镜检分析HAT培养基中处于分裂中期的杂种细胞,发现细胞内残留的人染色体如下表:
①编号为1的杂种细胞的基因型为____________。
②从表中数据分析,可将基因_________定位于_________染色体上,依据是______________。
③若将另一对等位基因也在人人身体上定位,理论上,可选择基因型分别为_________、_________的人、鼠细胞进行融合。
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若小鼠的造血干细胞内Rag2基因缺失,则不能分化为成熟的淋巴细胞。如图是治愈Rag2基因缺失引发的免疫功能缺陷症小鼠的流程图。请回答下列问题:
(1)重组细胞能在体外培养成早期胚胎,但上皮细胞却不能,由此说明________________________。
(2)图中②过程所用培养液的成分一般都比较复杂,除了一些____________外,还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清等物质。
(3)图中分离出的ES细胞是囊胚中的____________。除此之外,还可以从____________中提取ES细胞。
(4)图中③过程导入ES细胞的物质是____________。获得该物质用到的工具酶是____________。
(5)经④过程处理以后,为检测Rag2基因的表达情况,可提取该小鼠骨髓细胞的蛋白质,用____________(物质)进行直接检测,也可利用____________,观察小鼠的发病情况,进行间接检测。
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若小鼠的造血干细胞内Rag2基因缺失,则不能分化为成熟的淋巴细胞。如图是治愈Rag2基因缺失引发的免疫功能缺陷症小鼠的流程图。请回答下列问题:
(1)通过核移植技术获得的重组细胞能在体外培养成早期胚胎,但上皮细胞却不能,由此说明________________________________________。
(2)图中②过程所用培养液的成分一般都比较复杂,除了一些无机盐和有机盐外,还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及_____________等物质。
(3)图中分离出的ES细胞是囊胚中的__________。除此之外,还可以从__________中提取ES细胞。
(4)图中③过程导入到ES细胞中的是____________,所采用的技术是____________。
(5)经④过程处理以后,为检测Rag2基因的表达情况,可提取该小鼠骨髓细胞的蛋白质,用____________(物质)进行直接检测,也可利用____________,观察小鼠的发病情况,进行间接检测。
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