人血清蛋白（HSA)具有重要的医用价值。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两...

人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。下图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用__________法合成cDNA，再利用__________技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。

（2）构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是_________________________。

（3）在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加_________物质。

（4）选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有________________________（答出两点即可）。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析________________。

（5）利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是___________。

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人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。下图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用_______技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段_____________，以便根据这一序列合成引物。

（2）构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是___________。

（3）常采用农杆菌转化法将HSA基因导入水稻受体细胞，将含有HSA基因的重组质粒转入农杆菌时，常用Ca2+处理农杆菌，其目的是___。为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加_______物质。

（4）相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行_____ 。

（5）利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因______。

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人血清蛋白（HSA)具有重要的医用价值。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

(1)如果HSA基因序列未知，可以采用____________的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建_____________后才能导入宿主细胞。

(2)方框中的“？”一般选用的生物是________,为了提高II过程的导入成功率，通常用________处理大肠杆菌。

(3)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择_____途径（填I或II)获取rHSA更有优势。

(4)为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA,可以用_____________方法来进行检验。

A.检验HSA基因是否导入　　　　　　　　　　

B.检验细胞中是否产生相应的mRNA

C.抗原、抗体杂交　　　　　　　　　　　　　　

D.检测是否有标记基因

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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。

A.人血细胞启动子　　 B.水稻胚乳细胞启动子　 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是____________。

（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。

（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。

A.人血细胞启动子　　 B.水稻胚乳细胞启动子　 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子　

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是__________________________。

（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确空间结构才能有活性。与途径II相比，选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。

（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。

A.人血细胞启动子　　 B.水稻胚乳细胞启动子　 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子　

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是__________________________。

（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径II相比，选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。

（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

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人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。如图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用PCR技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_______，PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_________________。

（2）构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是_________________。

（3）在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加_________物质。

（4）选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有____________（答出两点即可）。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析_____________________。

（5）利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是_____________。

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人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。如图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用PCR技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_______，PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_________________。

（2）构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是_________________。

（3）在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加_________物质。

（4）选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有____________（答出两点即可）。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析_____________________。

（5）利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是_____________。

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人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。如图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用PCR技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_______，PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_________________。

（2）构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是_________________。

（3）在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加_________物质。

（4）选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有____________（答出两点即可）。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析_____________________。

（5）利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是_____________。

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人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。图一是以基因工程技术获取重组 HSA 的两条途径，其中报告基因表达的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色。图二为相关限制酶的识别序列和切割位点，以及 HAS 基因两侧的核苷酸序列。据图回答下列问题：

（1）在构建基因表达载体时，我们常常用不同的限制酶去切割目的基因和运载体来获得不同的黏性末端，原因是_____。依据图一和图二分析，在构建基因表达载体时下列叙述错误的是____

A．应该使用酶 B 和酶 C 获取 HSA 基因

B．应该使用酶 A 和酶 B 切割 Ti 质粒

C．成功建构的重组质粒含 1 个酶 A 的识别位点

D．成功建构的重组质粒用酶 C 处理将得到 2 个 DNA 片段

（2）PCR 技术应用的原理是_____，在利用该技术获取目的基因的过程中，以从　 生物材料中提取的 DNA 作为模板，利用_________寻找 HSA 基因的位置并进行扩增。

（3）图一过程①中需将植物细胞与_______________________混合后共同培养，旨在让__________________整合到植物细胞染色体 DNA 上；除尽农杆菌后，还须转接到含_____的培养基上筛 选出转化的植物细胞。

（4）图一③过程中将目的基因导入绵羊受体细胞，采用最多，也是最为有效的方法是_____。

（5）为检测 HSA 基因的表达情况，可提取受体细胞的_____，用抗血清 白蛋白的抗体进行杂交实验。

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