马铃薯是表达外源蛋白的理想受体材料。某科研小组通过农杆菌转化法获得高产重组人血清白蛋白(rHSA)的转基因马铃薯,下图是该小组构建的基因表达载体中T-DNA示意图。请回答:
(1)天然农杆菌Ti质粒的T-DNA上具有tms和tmr基因(分别控制合成植物生长素和细胞分裂素),在人工改造质粒时应使用________切除这两个基因,以防止____________________。
(2)构建基因表达载体时,在rHSA基因两端分别加上限制酶KpnⅠ和SalⅠ的识别序列(两种酶切割产生不同的黏性末端),从基因表达角度分析其目的是____________。科研小组PCR扩增rHSA基因时,其中一种引物碱基序列为:5'-CGGGGTACCGCCACCATGGATGCACACAAG-3',该序列含有KpnⅠ识别序列和增强表达的序列5'-GCCACC-3',则限制酶KpnⅠ的识别序列是_______________。
(3)将基因表达载体转入处于___________的农杆菌细胞中。用农杆菌转化液与马铃薯愈伤组织共培养一段时间后,为了得到已转化且不含农杆菌的愈伤组织,将感染后的愈伤组织转移至含有潮霉素和羧苄青霉素的培养基中培养,加潮霉素的目的是_______________,加羧苄青霉素的目的是____________。
高三生物非选择题中等难度题
马铃薯是表达外源蛋白的理想受体材料。某科研小组通过农杆菌转化法获得高产重组人血清白蛋白(rHSA)的转基因马铃薯,下图是该小组构建的基因表达载体中T-DNA示意图。请回答:
(1)天然农杆菌Ti质粒的T-DNA上具有tms和tmr基因(分别控制合成植物生长素和细胞分裂素),在人工改造质粒时应使用________切除这两个基因,以防止____________________。
(2)构建基因表达载体时,在rHSA基因两端分别加上限制酶KpnⅠ和SalⅠ的识别序列(两种酶切割产生不同的黏性末端),从基因表达角度分析其目的是____________。科研小组PCR扩增rHSA基因时,其中一种引物碱基序列为:5'-CGGGGTACCGCCACCATGGATGCACACAAG-3',该序列含有KpnⅠ识别序列和增强表达的序列5'-GCCACC-3',则限制酶KpnⅠ的识别序列是_______________。
(3)将基因表达载体转入处于___________的农杆菌细胞中。用农杆菌转化液与马铃薯愈伤组织共培养一段时间后,为了得到已转化且不含农杆菌的愈伤组织,将感染后的愈伤组织转移至含有潮霉素和羧苄青霉素的培养基中培养,加潮霉素的目的是_______________,加羧苄青霉素的目的是____________。
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人血清白蛋白(HSA)是血浆中含量最丰富的蛋白质,在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用,具有重要的医用价值。下图是用基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)为获取HSA基因,首先要提取人血细胞中的mRNA,利用__________法合成cDNA,再利用__________技术进行快速扩增,在这一过程中,需要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成_________。
(2)构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时,需要选择水稻胚乳细胞启动子,而不能选择其他物种和组织细胞的启动子,原因可能是_________________________。
(3)在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞,需添加_________物质。
(4)选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有________________________(答出两点即可)。但相比于水稻胚乳细胞,利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点,请从生物膜系统的角度进行分析________________。
(5)利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗,你推测的原因是___________。
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人血清白蛋白(HSA)是血浆中含量最丰富的蛋白质,在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用,具有重要的医用价值。下图是用基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)为获取HSA基因,首先要提取人血细胞中的mRNA,利用_______法合成cDNA,再利用_______技术进行快速扩增,在这一过程中,需要有一段_____________,以便根据这一序列合成引物。
(2)构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时,需要选择水稻胚乳细胞启动子,而不能选择其他物种和组织细胞的启动子,原因可能是___________。
(3)常采用农杆菌转化法将HSA基因导入水稻受体细胞,将含有HSA基因的重组质粒转入农杆菌时,常用Ca2+处理农杆菌,其目的是___。为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞,需添加_______物质。
(4)相比于水稻胚乳细胞,利用大肠杆菌获得的rHSA有一些缺点,请从生物膜系统的角度进行_____ 。
(5)利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗,你推测的原因______。
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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。
(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母,单选)。
A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是____________。
(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。
(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。
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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。
(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母,单选)。
A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是__________________________。
(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确空间结构才能有活性。与途径II相比,选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。
(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。
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人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。
(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母,单选)。
A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是__________________________。
(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径II相比,选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。
(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。
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人血清蛋白(HSA)具有重要的医用价值。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)如果HSA基因序列未知,可以采用____________的方法获取该目的基因,为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存,通常要先构建_____________后才能导入宿主细胞。
(2)方框中的“?”一般选用的生物是________,为了提高II过程的导入成功率,通常用________处理大肠杆菌。
(3)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性,所以,选择_____途径(填I或II)获取rHSA更有优势。
(4)为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA,可以用_____________方法来进行检验。
A.检验HSA基因是否导入
B.检验细胞中是否产生相应的mRNA
C.抗原、抗体杂交
D.检测是否有标记基因
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为了改善马铃薯的品质,增加其蛋白质含量,使做出的马铃薯粉条更加有嚼劲。某科研小组将某种蛋白基因成功导人马铃薯细胞,得到了转基因植株。请回答下列问题:
(1)将目的基因导人马铃薯细胞,经常采用农杆菌转化法。操作时,需要先将目的基因插入到________,通过转化作用,最终将目的基因插入到马铃薯细胞中染色体的DNA上。
(2)科研小组欲将转基因马铃薯细胞进一步培养成幼苗。如上图所示,需将细胞接种到诱导培养基上,通过_______________过程形成结构1,再转接到培养基2即_______________培养基上培养一段时间, 就可以诱导出试管苗。在这一过程中使用的固体培养基是由无机营养成分、有机营养成分、_______________四部分组成。
(3)科研小组若要将转基因马铃薯细胞与番茄细胞杂交,需要首先用酶解法去掉细胞壁。去掉细胞壁的原因是_______________。杂交过程的另一个关键环节是原生质体间的融合,所需人工诱导的方法分为两大类,其中物理法包括_______________。但最终没能如愿培养出如图C所示的结果,分析其原因可能是_____________________________________________。
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利用外源基因在受体细胞中表达可生产人类所需要的产品。下列叙述中能说明外源基因在受体细胞中成功表达的是( )
A.棉花体细胞中检测到苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白
B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D.酵母菌细胞中检测到重组载体上的标记基因
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人血清白蛋白(HSA)是血浆中含量最丰富的蛋白质,在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用,具有重要的医用价值。如图是用基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)为获取HSA基因,首先要提取人血细胞中的mRNA,利用_______法合成cDNA,再利用PCR技术进行快速扩增,在这一过程中,需要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成_______,PCR过程中,温度降低到55℃的目的是_________________。
(2)构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时,需要选择水稻胚乳细胞启动子,而不能选择其他物种和组织细胞的启动子,原因可能是_________________。
(3)在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞,需添加_________物质。
(4)选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有____________(答出两点即可)。但相比于水稻胚乳细胞,利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点,请从生物膜系统的角度进行分析_____________________。
(5)利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗,你推测的原因是_____________。
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