某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培...

某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

（1）培养皿用_____灭菌；培养基灭菌后，待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________________，造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是__________________。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为___________。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有________个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为____________。

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【选修1——生物技术实践】尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？____(填“能”或“不能”），原因是____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是____。

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【生物一选修1生物技术实践】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________（填“能”或“不能”），原因是_________________。

（2）培养基用________方法灭菌，培养皿用________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____(填“能”或“不能”），原因是_____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是_____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用_____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为_____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是_____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是_____。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

（2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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Ⅰ.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）在分离土壤中能分解尿素的细菌的实验中，用于接种的培养基常用________法灭菌，要统计每克土壤样品中活菌数目时，常用___________法接种培养后统计数目。

（2）实验室中筛选微生物的原理一般是_______________________________________。

Ⅱ.乳酸菌是存在于人体肠道内的益生菌，能助消化，利于肠道健康，因此常用于酸奶的制作。回答下列题：

（3）含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是_______________。

（4）酸奶制作时杀菌很重要，牛奶一般用______法杀菌。

（5）乳酸菌也常用于泡菜的制作，腌制泡菜过程中亚硝酸盐含量的总体变化是____。

（6）在市场上购买的真空包装泡菜，在没有发生漏气状态下出现了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并写出理由。支持____同学的观点，理由是________________。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：

K2HPO4　　 NaCl　　 H2O　　 葡萄糖　　 尿素　　 酚红　　 琼脂

0.12g　　 0.12g　　 15mL　　 0.025g　　 2.0g　　 0.25mg　　 0.5g

（1）分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ 参与了氮循环（或维持氮平衡） ．写出细菌分解尿素的方程式 ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ 不能 （能/不能），原因是 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物 ．

（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技术．

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下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是（　　 ）

A．微生物培养前，需对培养基进行消毒

B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法

C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度

D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源

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