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研究者取野生型小鼠（Ⅰ+Ⅰ+)的胚胎干细胞，转入含neor基因（新霉素抗性基因）的DNA片段，定向突变Ⅰ+基因（结果如图1),再将突变的胚胎干细胞移回野生型小鼠胚胎，培育出带突变基因（Ⅰ-）的杂合子小鼠。
(1)将外源DNA片段导入胚胎干细胞后，需用含______的培养基培养细胞，以筛选得到突变的胚胎干细胞。
(2)用此杂合体小鼠与野生型小鼠进行杂交实验，并通过DNA分子杂交技术检测小鼠的基因型，结果如图2。
①检测小鼠的基因型，需根据________序列设计DNA分子探针。根据杂交实验结果推测，I基因的功能是与____________有关。
②分析系谱图________(能/不能）判断Ⅰ+、Ⅰ-基因的显、隐性，理由是_________.
③只有突变基因来自_______(父本/母本）时，杂合子小鼠才表现出发育迟缓，由此推测来自_______的I基因在体细胞中不表达。
④提取小鼠体细胞的总RNA,加入Actin基因（编码细胞骨架蛋白）和neor基因的RNA探针，之后加入RNA酶水解单链RNA。若探针能与细胞样品的RNA结合成双链RNA则不被酶水解而保留，电泳分析时呈现明显条带（在记录实验结果时，有明显条带用“+”表示，无明显条带用“一”表示)。请将支持③推测的实验结果填入下表ⅰ、ⅱ、ⅲ处。ⅰ___；ⅱ___；iⅱ___。
(3)杂合子小鼠雌雄个体交配，则后代的表现型及比例为________。
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研究者取野生型小鼠（I+I+）的胚胎干细胞，转入含neor基因（新霉素抗性基因）的DNA片段，定向突变I+基因（结果如图a），再将突变的胚胎干细胞移回野生型小鼠胚胎，培育出带突变基因（I-）的杂合子小鼠。
（1）将外源DNA片段导入胚胎干细胞后，需用含__________的培养基培养细胞，以筛选得到突变的胚胎干细胞。
（2）用此杂合体小鼠与野生型小鼠进行杂交实验，并通过DNA分子杂交技术检测小鼠的基因型，结果如图b。
①检测小鼠的基因型，需根据__________序列设计DNA分子探针。根据杂交实验结果推测，I基因的功能是与__________有关。
②分析系谱图__________（能/不能）判断I+、I-基因的显、隐性，理由是____________________。
③只有突变基因来自__________（父本/母本）时，杂合子小鼠才表现出发育迟缓，由此推测来自____________________的I基因在体细胞中不表达。
④提取小鼠体细胞的总RNA，加入Actin基因（编码细胞骨架蛋白）和neor基因的RNA探针，之后加入RNA酶水解单链RNA。若探针能与细胞样品的RNA结合成双链RNA则不被酶水解而保留，电泳分析时呈现明显条带（在记录实验结果时，有明显 条带用“+”表示，无明显条带用“-”表示）。请将支持③推测的实验结果填入下表i、ii、iii处。
| 野生型小鼠 | 突变基因来自父本的杂合子小鼠 | 突变基因来自母本的杂合子小鼠 |
| Actin基因的RNA探针 | + | + | + |
| neor基因的RNA探针 | i__________ | ii__________ | iii__________ |
（3）杂合子小鼠雌雄个体交配，则后代的表现型及比例为__________。
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科研人员获得了两种单基因被“敲除”的拟南芥突变体——C2和C5，与野生型比较，根毛长度或主根长度发生了变化，如下图所示。
(I)科研人员通过____法将T-DNA上插入了青霉素抗性基因的Ti质粒转入拟南芥细胞中，经筛选获得C2和C5突变体。从功能上来说，筛选转基因拟南芥时所使用的含有青霉素的培养基属于____培养基。
(2)据图可知，C2的表现型是____，推测C2的基因被“敲除”后，很可能影响了细胞的____生长。
(3)将C2和C5突变体杂交，F1全部表现为野生型，说明这两种突变均为____突变。让F1植株随机授粉，将所得的种子播种在含有青霉素的培养基中，发现有l%的种子不能完成萌发，推测这两对基因____。预测双突变体植株的表现型为____，双突变体植株在F2中所占比例为____。
(4)研究发现，C5植株根部的分生细胞在有丝分裂时缺乏一种周期性出现和消失的酶，这种酶与纤维素的合成有关。请解释C5植株出现突变性状的原因________________。
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科研人员获得了两种单基因被“敲除”的拟南芥突变体——C2和C5，与野生型比较，根毛长度或主根长度发生了变化，如下图所示。
(I)科研人员通过____法将T-DNA上插入了青霉素抗性基因的Ti质粒转入拟南芥细胞中，经筛选获得C2和C5突变体。从功能上来说，筛选转基因拟南芥时所使用的含有青霉素的培养基属于____培养基。
(2)据图可知，C2的表现型是____，推测C2的基因被“敲除”后，很可能影响了细胞的____生长。
(3)将C2和C5突变体杂交，F1全部表现为野生型，说明这两种突变均为____突变。让F1植株随机授粉，将所得的种子播种在含有青霉素的培养基中，发现有l%的种子不能完成萌发，推测这两对基因____。预测双突变体植株的表现型为____，双突变体植株在F2中所占比例为____。
(4)研究发现，C5植株根部的分生细胞在有丝分裂时缺乏一种周期性出现和消失的酶，这种酶与纤维素的合成有关。请解释C5植株出现突变性状的原因________________。
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赤霉素和脱落酸是植物体的重要激素，种子萌发时释放大量的赤霉素会降解脱落酸。研究者向野生型玉米中转入基因E，使其细胞中赤霉素含量减少（突变体），并以野生型和突变型植株为材料进行实验，结果如下图。下列相关叙述不正确的是
A．转入到玉米植株的基因E，可以通过花粉传入其它物种
B．当赤霉素含量降低时，有利于玉米在逆境中生长和发育
C．突变体对外源脱落酸敏感性高，可能是由于植株中脱落酸含量较高
D．据表分析可知，脱落酸对两种玉米种子萌发的调节作用具有两重性
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[生物选修三 现代生物科技专题]
基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。结合图示回答问题。
注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。
（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA 片段都重组到 上，构建打靶载体（基因表达载体）。
（2）打靶载体测序验证正确后，利用 酶，将之线性化，以提高重组率。通过 技术导入胚胎干细胞，这样打靶载体与细胞内靶基因同源的区段就有几率发生同源重组。
（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入 。最后还需要通过 技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过 培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中，暂时不用的细胞进行液氮（或冷冻）保存。
（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、 的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行 检查，确保其生下嵌合小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的 （选填“体细胞”、“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。
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基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。请结合图示回答下列有关问题：
注：neor 是新霉素抗性基因；tk 基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。
（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的 DNA 片段都重组到__________上，构建打靶载体（基因表达载体）。
（2）打靶载体测序验证正确后，利用__________酶，将之线性化，以提高重组率。通过__________技术将打靶载体导入胚胎干细胞，这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。
（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入__________。最后还需要通过__________技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过动物细胞培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中， 暂时不用的细胞进行__________保存。
（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、__________的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查，确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的__________（填“体细胞”或“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。
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基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。请结合图示回答下列有关问题：
注：neor 是新霉素抗性基因；tk 基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。
（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的 DNA 片段都重组到__________上，构建打靶载体（基因表达载体）。
（2）打靶载体测序验证正确后，利用__________酶，将之线性化，以提高重组率。通过__________技术将打靶载体导入胚胎干细胞，这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。
（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入__________。最后还需要通过__________技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过动物细胞培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中， 暂时不用的细胞进行__________保存。
（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、__________的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查，确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的__________（填“体细胞”或“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。
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基因敲除是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，其基本原理如右图所示。如果利用基因敲除的方法，将目的基因转入小鼠胚胎干细胞，经过一系列过程可获得目的基因稳定遗传的转基因小鼠。请回答下列问题：
（1）若要切割某DNA片断，如图所示,该限制酶能识别的碱基序列是__________，切点在_________之间。
（2）将目的基因转入小鼠胚胎干细胞后，胚胎干细胞能够发育成转基因小鼠，所依据的生物学原理是__________。胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生________，还可通过体外定向诱导，培育出人造_______________。
（3）基因敲除技术中存在着一个难以克服的缺陷：敲除了某个基因后，可能不会产生容易识别的表型改变，因此就不能获知该基因的功能，请你分析原因：_________________________。
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卡那霉素能引起野生型苎植株（2N）黄化，育种专家向野生型苎麻的核基因组中随机插入已知序列的sDNA片段（含卡那霉素抗性基因），通过筛选得到突变体Y，sDNA片段的插入使基因A的功能丧失，从突变体的表现型可以推测野生型基因A的功能。
（1）野生型苎麻的核基因组插入已知序列的sDNA片段引起的变异类型属于___（基因突变/染色体变异）。
（2）将突变体自交所结的种用子75%酒精消毒处理30s后，接种在含有_____的培养基中，实验设置3个重复组，在适宜条件下光照培养。一段时间后若培养基上有绿色有幼苗，则可确定苎麻植株的DNA中含有_____，实验设置3个重复的目的是________。
（3）统计培养基中突变体Y自交产生大量后代，绿色幼苗和黄色幼苗性状分离比例接近于1：1，突变型（A+）对野生型（A）______（显性/隐性），自交结果____（符合/不符合）孟德尔自交实验的比例。
（4）育种专家进一步设计杂交实验以检测突变体Y（突变基因为A+）产生的_______，实验内容及结果见下表。
| 杂交亲本 | 实验结果 |
| 突变体Y（♀）×野生型（♂） | 绿色:黄色=1:1 |
| 突变体Y（♂）×野生型（♀） | 黄色 |
由实验结果可知，x片段插入引起的变异会导致____致死，进而推测基因A的功能与____有关。