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[生物——选修3:现代生物科技专题]
某科研小组希望将蚕丝蛋白基因导入大肠杆菌中生产蚕丝蛋白，设计操作过程如下：
①从家蚕细胞中获取蚕丝蛋白基因的mRNA，并得到相应的cDNA；②对cDNA进行PCR扩增；③将cDNA导入大肠杆菌；④……
回答下列问题：
（1）①、②过程所需的酶分别主要有____________和____________。
（2）在进行PCR扩增时需要合成____________种引物，根据基因工程的操作程序，第④步还需进行目的基因的____________，以确定目的基因是否稳定维持和____________其遗传特性。请简述确定目的基因转录出相应mRNA的操作过程:________________________。
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【选修3——现代生物科技专题】
下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞（ES细胞）中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析回答：
（1）天然质粒往往需要经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有___________（填序号）。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④启动子 ⑤起始密码子
（2）该过程使用了工具酶___________和DNA连接酶，完成目的基因的获取和___________。
（3）过程III常用的方法是___________，第III步操作后，还需经过筛选出含___________的重组DNA分子胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。
（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是______________________。
（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行______________________。
（6）若经过图示过程培育成的小鼠仍为黑色，则能否说明未成功导入棕褐毛基因？_________。你的理由是____________________________________________________________。
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【生物一一选修3:现代生物科技专题】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达软体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、_______、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________，用_______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序处胚胎移植，其实效是___________ 。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割___________？
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用___________技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 中，植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 ；
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件， 诱导其经过 产生愈伤组织等，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核转移实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）： 。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
我国科学家利用农杆菌介导法，将含高赖氨酸蛋白基因（sb401)的表达载体导入玉米细胞，最终培育出“转高赖氨酸蛋白基因（sb401)玉米”。结合图示回答下列问题：
（1）sb401基因可以通过____________在短时间内大量扩增，该过程为：目的基因DNA受热后解链，引物与单链相应互补序列结合，然后在耐热的___________作用下进行延伸，如此重复循环多次。构建基因表达载体时，为了便于sb401基因与Ti质粒连接,应怎样处理含该基因的DNA分子和质粒？_________________。
（2）③过程为重组质粒导入农杆菌的过程，常用__________溶液处理农杆菌，使其转化为__________。⑥过程得以实现，与Ti质粒上的__________密切相关。
（3）目的基因能否在玉米植株中维持和表达其遗传特性的关键是_________________。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是____________________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题] 为获得Bt杀虫蛋白的转基因马铃薯，研究人员把苏云金杆菌中的Bt杀虫蛋白基因导入马铃薯体细胞，从培育出转基因马铃薯新品种。
回答下列问题：
（1）Bt杀虫蛋白基因来自苏云金杆菌。可利用苏云金杆菌细胞内合成的__________通过逆转录形成单链DNA片段，从而获得目的基因。在生物体外采用PCR技术扩增目的基因，扩增时需要加入引物，其引物是____________________。
（2）除了通过上述方法可以获取Bt杀虫蛋白基因外，还可以通过化学合成的方法获取Bt杀虫蛋白基因，其前提条件是通过Bt杀虫蛋白的__________推导出mRNA核苷酸序列，再合成该基因的脱氧核苷酸序列，这样合成的目的基因与从cDNA文库获取的目的基因相比，脱氧核苷酸序列可能不相同，原因是____________________。
（3）构建基因表达载体时，通常用同种限制性核苷酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，原因是______________________________。用农杆菌转化法将基因表达载体导入植物细胞，此过程利用了Ti质粒具有__________特点。
（4）从个体生物学水平鉴定转基因马铃薯的培育是否成功，需要对转基因马铃薯进行__________________。
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［生物——选修3：现代生物科技专题］（15分，除注明外，每空2分）
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 中，植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
研究人员将人工丝蛋白基因导入到蚕卵内，对蚕卵的基因改造获得成功。含有人工丝蛋白的蚕茧发出绿色荧光，比正常的蚕茧更加轻薄。请回答下列问题：
（1）进行转基因操作前，需用_____________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。将人工丝蛋白基因导入到蚕卵体内，常用的方法是_____________。
（2）绿色荧光蛋白基因可以作为_____________，用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因。
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导人家蚕细胞。PCR技术利用的原理是_____________，该PCR 反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、_____________和_____________。
（4）生物反应器培养家香细胞时会产生接触抑制，所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器 中，这样可以通过_____________来增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
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