分离分解纤维素的微生物的实验流程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分...

分离分解纤维素的微生物的实验流程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选符合要求的菌落。请回答下列问题。

（1）土壤取样一般选择____________丰富的环境。进行选择培养的目的是____________。

（2）测定土壤中纤维素分解菌的数量，一般选用_________________倍的稀释液进行培养。

（3）将样品用____________________（填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”） 接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，具体操作都要在_____________________附近完成。

（4）刚果红可与纤维素形成________________复合物，因此纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的__________________，据此可以筛选纤维素分解菌。

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植物中的纤维素能被土壤中的某些微生物分解，下图为分离纤维素的微生物的实验流程。请回答：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选特定的菌落

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它包括C1酶、　　　　　　 、　　　　　　　 。

（2）在使用超净工作台前，可以用　　　　　　　　 照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒　　　　　　　　 溶液（写出一种即可），可以加强消毒效果。

（3）上图中选择培养的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）需要在鉴别培养基中加入　　　　　　　　 染料，通过颜色反应对分解纤维素的微生物进行筛选。产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的　　　　　　　　　　　　 。筛选到的菌种可以采用　　　　　　　　　 的方法长期保存。

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某兴趣小组用从不同环境中采集的土壤等进行了“分解纤维素的微生物的分离”实验，实验过程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落，实验结果见下表1：

表1　不同土壤微生物对纤维素的分解

（1）上述实验过程中“选择培养”的目的是________________。

（2）与30℃相比，37℃培养时霉菌类纤维素分解菌生长迅速，菌丝会________其他菌落，对后续菌种的分离造成困扰，因此采用30 ℃培养为佳。

（3）兴趣小组在鉴别菌种时尝试了两种方案：A． 先培养微生物，再加入刚果红染色；B． 直接在加入刚果红的鉴别培养基上培养微生物。结果发现：A方案在漂洗多余刚果红的过程中，易出现菌落浮起被带走的现象，从而造成________，故选方案B。由于刚果红在高温下容易被分解，应在培养基灭菌________（填“前”或“后”）加入。

（4）有小组成员根据表1结果中的________，认为菌料中的目的菌分解纤维素的能力最强，其他成员对此观点提出异议。兴趣小组继续对三组样品进行透明圈直径、菌落直径和酶活力的测定，实验结果如下表2：

表2　不同H/C值纤维素分解菌酶活性的比较

你认为将________作为判断纤维素分解菌分解能力大小的依据更合理，其大小与酶活力呈________相关。

（5）兴趣小组欲对培养液中的纤维素分解菌进行计数，具体做法是：先在培养基上加入若干质量较轻的小球，然后在平板上滴加一定体积的培养液，盖上培养皿盖后左右摇晃。试分析这样做的目的是________。

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纤维素酶的成本是影响乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。回答下列问题：

（1）最好选择____________环境采集土样。

（2）以下是一种培养基配方：

利用该培养基培养的目的是__________，在该培养基中_____________是唯一碳源。

（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入__________染液，加入染液的方法有两种:一种先培养微生物，再加入染液进行颜色反应；另一种是在________时加入染液。

（4）将筛选获得的菌液稀释后用__________(方法)接种到鉴别培养基上，然后挑选产生_________的菌落作为菌种进行扩大培养。

（5）请设计实验检测纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量的思路:________________________。

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从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是

A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→发酵培养

B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落

C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落

D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落

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（15分）生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养

请回答下列有关问题：

（1）将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是_________。

（2）在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有_______，常使用_______的方法从发酵液中提取纯酒精。

（3）从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在_______环境中采集土样，所选择的培养基应以_______作为唯一碳源。

（4）纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行_______处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和_______法。

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土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：

土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基

（1）纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和__________组成。

（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是__________。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以__________作为主要碳源。

（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是__________，这一步一般选用__________（填“固体”或“液体”）培养基。

（4）梯度稀释后用__________（仪器）将菌种接种在培养基表面。

（5）用__________染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映____________________。

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甲、乙、丙三个生物兴趣小组按如下三个流程进行课外探究活动。

兴趣小组乙：挑选豆腐→豆腐长毛→加盐腌制→加卤装瓶→密闭腌制

兴趣小组丙：土壤取样→梯度稀释→接种于培养基→计数

请回答下列问题：

（1）甲组由果酒的制作转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是____________，请写出酒精发酵的反应式：________________。

（2）乙组在制作腐乳过程中，先将切好的豆腐块放置在笼屉内，为使毛霉发酵充分，必须提供适宜的温度和____________等条件。豆腐块上生长的毛霉菌丝来自于_________。密封腌制时添加卤汤，卤汤中的酒的含量应控制在12%左右，酒精含量过低会导致_______。

（3）丙组欲按以上方法统计土壤中降解苯酚的某菌株的数量，其流程中土壤样品稀释后，应该接种于___________培养基上。该组同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为80，则每毫升样品中的菌株数是__________个（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2毫升）。实验结束后，使用过的培养基应该进行______________处理后，才能倒掉。

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当猪粪和小麦秸秆自然堆肥的温度上升到55℃时，实验小组采集样品以获取纤维素高温分解菌。下图表示目的菌的分离过程，请回答下列问题：

在高温堆肥中取样→选择培养→X→将样品接种到鉴别纤维高温分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落

（1）在取样前，对猪粪和小麦秸秆进行高温堆肥的目的是_________。取样后进行选择培养的目的是______________________。

（2）图中X所表示的操作过程为_________，之后需要将样品接种到_______（物理性质）培养基上。

（3）鉴别纤维素高温分解菌的培养基的成分为羧基甲纤维素钠（CMC-Na）12.0g、NaCl 4.0g、NH2PO4 2.0g、MgSO4•7H2O 0.3g、蒸馏水100mL、琼脂、刚果红，pH为7.0～7.4。

①分析培养基的成分可知，该培养基中为纤维素高温分解菌提供碳源的物质是_____________。若要培养霉菌，需要将培养基的pH调至________（填“酸”“碱”或“中”）性。

②鉴别纤维素高温分解菌的原理是纤维素能和刚果红形成一种__________________，而纤维素高温分解菌能产生_____________________将纤维素分解而出现透明圈。

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请回答下列有关微生物培养和分离的问题。

（1）筛选石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样→______→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中第二步的目的是______。

（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是_________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿____培养。

（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：__________________；_________________。

（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行______处理。

（5）现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序， 于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。

根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是________________。

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