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[生物——选修1:生物技术实践]请回答与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的有关问题。
(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、________、________和无机盐。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_____和___________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_______。
(3)可以通过____________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成____。
(4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则土壤细菌的增长呈现___型曲线增长。
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请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题
（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、 和无机盐。
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是 和 两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是 。
（3）可以通过_____________________________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能合成__________。
（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则土壤细菌的增长呈现____型曲线增长。
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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：
(1)能分解尿素的细菌代谢类型为＿＿，应从富含有机质的土壤表层取土样。
(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________的培养基进行分离，并加入＿＿＿指示剂进行鉴别。
(3)若取土样5g，应加入＿＿ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要＿＿＿以减少误差。将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用＿＿＿＿将菌液铺平。这种接种方法称为＿＿＿＿。
(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有＿＿＿＿(现象)的菌落数，结果如下表，其中＿＿＿＿倍的稀释比较合适。
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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：
（1）能分解尿素的细菌代谢类型为 异氧需氧型 ，应从富含有机质的土壤表层取土样．
（2）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用 尿素为唯一氮源 的培养基进行分离，并加入 酚红 指示剂进行鉴别．
（3）若取土样5g，应加入 45 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液．取样稀释前，一定要 摇均 以减少误差．将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 将菌液铺平．这种接种方法称为 稀释涂布（平板）法 ．
（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有 红色环带 （现象）的菌落数，结果如下表，其中 105或106 倍的稀释比较合适．
稀释倍数 103 104 105 106 107
菌落数（个） 500 367 248 36 18
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（１５分）根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入 制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是 。
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是 。
（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在 期，花药培养成功率高。
（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是 ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入ＮａＣｌ，增加盐浓度的目的是 。
（５）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养２天，加入适量食盐，经密封放置１０天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的 分解。最终使 含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。
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根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入_____制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_______________________________。
（2）生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是__________。
（3）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是__________，玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是___________。
（4）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置l0天后制得豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的________分解，最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。
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根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是________。
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________。
（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在________期，花药培养成功率高。
（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是________。
（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的________分解。最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。
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[生物——选修1：生物技术实践专题]（15分）
下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题。
（1）图1中方框内应该填写的的实验步骤是 ，此步骤中起主要作用的微生物是 ，其发
酵时 （需要／不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是 。
（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ (能/不能)，原因
是 。
（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是 。通常鉴定分
解尿素的细菌的方法是在培养基中加入 指示剂。
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某生物活动小组为测定当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作如下：
请分析并回答下列问题：
（1）为了筛选和分离尿素分解菌，培养基中需要添加____________作为唯一氮源，除了必需的营养物质外，培养基中还需要添加____________。尿素分解菌能产生脲酶，把尿素分解成____________。
（2）在上述系列梯度稀释时，吸取前一试管（或锥形瓶）中lmL菌液到后一试管的工具是____________，该工具在使用前需要进行____________灭菌。
（3）实验结果：3号试管涂布的三个平板的菌落数为560、601、24，4号试管涂布的三个平板的菌落数为57、59、61，5号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10克土壤样品中含有尿素分解菌的估算数目是____________。通过该方法计算出来的数值往往比实际值低，原因是____________。在进行实验时，除了涂布的三个平板外，还需要至少准备一个空白培养培养基做对照，目的是____________。
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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。
（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离，这种培养基属于______培养基（按功能分类）。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。
（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______（低/高）。
稀释倍数
103
104
105
106
107
菌落数
（个）
1号平板
478
367
277
26
5
2号平板
496
354
261
20
8
3号平板
509
332
254
29
3
（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102 ，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。
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