我省是农业大省，向土壤中添加农作物秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。安徽农业大...

我省是农业大省，向土壤中添加农作物秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。安徽农业大学某研究小组欲筛选农作物秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌(能够独立进行固氮的细菌)，组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下表为本实验两种相关培养基配方，请回答：

（1）两种培养基中，能用于筛选自生固氮菌的是___________，理由是___________。另一种培养基中需加入___________，筛选纤维素分解菌。

（2）筛选出纤维素分解菌(命名为X)后，需进行农作物秸秆降解能力测定，农作物秸秆主要为X提供___________。

（3）分离纯化得到自生固氮菌(命名为N)并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可在显微镜下用___________直接计数，该方法的测量值比活菌的实际数目________。

（4）无菌操作下在相关培养基上均匀涂布N(或X)，晾干后在其表面接种X(或N)，适宜条件下培养一段时间后，若X(或N)周围___________(填“有”或“无”)抑菌圈(细菌生长受到抑制形成的透明圈)出现，则两种微生物适合联合施用，原因是________________。

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我省属黄土高原半干旱地区，向土壤中添加玉米秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。中北大学某研究小组欲筛选玉米秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌(能够独立进行固氮的细菌)，组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下表为本实验两种相关培养基配方，请回答：

(1)两种培养基中，能用于筛选自生固氮菌的是___________，理由是___________。另一种培养基中需加入___________，筛选纤维素分解菌。

(2)筛选出纤维素分解菌(命名为X)后，需进行玉米秸秆降解能力测定，玉米秸秆主要为X提供___________。

(3)分离纯化得到自生固氮菌(命名为N)并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可在显微镜下用___________直接计数，该方法的测量值比活菌的实际数目___________。

(4)无菌操作在相关培养基上均匀涂布N(或X)，晾干后在其表面接种X(或N)，适宜条件下培养一段时间后，若X(或N)周围___________(填“有”或“无”)抑菌圈(细菌生长受到抑制形成的透明圈)出现，则两种微生物适合联合施用，原因是___________。

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我省属黄土高原半干旱地区，向土壤中添加玉米秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。某大学某研究小组欲筛选玉米秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌（能够独立进行固氮的细菌），组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下面为本实验两种相关培养基配方，请回答：

培养基1：CMC - Na、NaCl、KH2 PO4，MgSO4·7H2O、蛋白胨、琼脂、蒸馏水

培养基2：KH2 PO4，NaCl、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水

（1）培养基1中主要碳源是______ 。两种培养基中，培养基2能用于筛选自生固氮菌因为___________。

（2）欲用培养基1筛选出纤维素分解菌，培养基1中还需要加___________，在筛选出纤维素分解菌（命名为X）后，需进行玉米秸秆降解能力检测，一般采用对___________进行定量的测定。

（3）分离纯化得到自生固氮菌（命名为N）并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可用活菌计数法或_____， 后者计数方法的测量值一般比活菌的实际数目___________。

（4）无菌操作在相关培养基上均匀涂布N（或X），晾干后在其表面接种X（或N），适宜条件下培养一段时间后，若X（或N）周围______（填“有”或“无"）抑菌圈（细菌生长受到抑制形成的透明圈）出现，则两种微生物适合联合施用，原因是___________。

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[生物－选修I生物技术实践](15分)

尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL。实验过程如右图所示:

回答下列问题:

(1)该培养基能筛选出目的菌的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是　　　　　　　　　　 。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入　　　　　　　 指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成　　　　　　 色，则可说明该菌种能够分解尿素。

(3)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是　　　 　　 ，需要消毒的是 　　 　 （填序号）。

①培养细菌的培养基与培养皿 　　 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 　　 ③实验操作者的双手

(4)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有　　　 　 （填序号）。

①所取土样不同　 　 ②培养基被污染 　 ③接种操作错误 　 ④没有设置对照实验

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行　　　　　　　　 处理后，才能倒掉。

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尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。请回答：

（1）科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的 TaqDNA聚合酶，Taq细菌是一位科学家在一个热泉中发现的，这对我们寻找目的菌株时有什么启发？__________________。

（2）本实验使用的培养基能够允许分解尿素的细菌生长，之所以能筛选出目的菌的原因是__________________。使用稀释涂布平板法来统计样品中目的菌的数目时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是__________。

（3）初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入_______指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成________色，则可说明该菌种能够分解尿素。

（4）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是_______，需要消毒的是_______（填序号）（①培养细菌的培养基与培养皿　 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管　 ③实验操作者的双手）。

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尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL。实验过程如图所示：

请回答下列问题：

（1）微生物的生长繁殖所需的营养物质有碳源、水、无机盐和__________。该培养基能筛选出目的菌的原因是______________________________。

（2）使用稀释涂布平板法来统计样品中目的菌的数目时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是______________________________。

（3）初步筛选出来的菌种还需要进一步鉴定：在培养基中加入__________指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成__________色，则可说明该菌种能够分解尿素。

（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有__________（写出两点即可）。

（5）为了确定目的菌产生脲酶分解尿素的最适温度，某同学测得在相同时间内，10g尿素在30℃、35℃、 40℃温度下降解后剩余量分别为8g、3g、9g。若要进一步确定酶的最适温度，应围绕__________℃设计后续实验。

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农作物秸秆是重要的生物资源，下图是研究人员筛选纤维素分解菌的部分实验过程，请回答相关问题：

（1）应用______溶解土壤.培养基A的成分为纤维素粉、Na2HPO4·7H2O、K2HPO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素和水。培养基B是培养基A中加入某种成分制得，该成分为______.用培养基A进行培养的目的是__________________________。

培养基B________（选填“有”或“无”）选择作用，请设计一个对照实验来验证你的判断：__________________________________________________________________________________________。

（2）取培养基B中的菌落1按照严格无菌操作接种于培养基C，在适宜条件下培养后出现两种单菌落a和b，最可能的原因是_____________________。

（3）对菌落a中纤维素分解菌所产纤维素酶的活力进行了探究，结果如下。

一个酶活力单位是指______________________。若用菌落a中的纤维素分解菌分解秸秆，则pH和温度应分别是____________________。

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对于农作物秸秆的处理手段越来越倾向于添加高效降解微生物进行腐熟堆肥。为了寻求高效降解纤维素的微生物，某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下：

①制备培养基。

②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液，经适当稀释后，移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。

③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，使用刚果红染色法，根据培养基平板上透明圈直径（D）与菌落直径（d）比值的大小，初步筛选出纤维素优势分解菌。

回答下列问题：

（1）为了制成固体培养基，除了水、碳源、氮源和无机盐等基本配方以外，培养基中通常还需加入________。微生物吸收的无机盐的作用是_________________________________________________________________（答出两点即可）。

（2）步骤②、③中，若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，可能导致错过优势纤维素分解菌的发现，原因是___________________________。某研究人员将1mL培养液稀释100倍后，在4个平板上分别接入0.1mL的稀释液，经适当培养后，4个平板上的菌落数分别是15、151、155、159，据此可得出1L培养液中的活菌数是__________个。

（3）步骤③中，刚果红可以与纤维素形成______色复合物。接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表。据表分析，哪号菌株产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大？理由是什么？_______________________________________________

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（12分）尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

（1）此培养基能否用于植物组织培养？　　　　　 ，理由是　　　　　 。

（2）培养基中氮源是　　　　　 ，这种培养基在功能上属于　　　　　 培养基,目的是只允许能合成　　　　　 的微生物生长，其他微生物均不能生长。

（3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用　　　　　 法进行接种。

（4）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　　 ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是　　　　　 法。

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（15分）。尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，

实验步骤如图所示。请分析回答。

（1）此培养基________（能/不能）用于植物组织培养，理由是________。

（2）培养基中加入尿素的目的是________，这种培养基属于________培养基。

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验需要振荡培养，原因是________。

（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用________或________接种，获得单菌落后继续筛选。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为惟一氮源的培养基中加入________指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成________色，则可准确说明该菌种能够分解尿素。

（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是________，需要消毒的是________（填序号）。①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手

（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________（填序号）。

①土样不同  ②培养基污染  ③操作失误  ④没有设置对照

（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。

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