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[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）
目前栽培的主要香蕉品种是三倍体或多倍体，不结种子，因此无性繁殖成了主要种植方式。长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展。为提高其产量，某生物小组利用转基因技术培育抗病香蕉。培育过程如图所示，
（1）获得抗病基因后，常利用 技术进行扩增，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 。该技术需要的酶是 酶。
（2）将目的基因导入植物细胞常用的方法有多种，图中所示方法为 。欲检测转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因，可采用 技术。
（3）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。
（4）香蕉的抗病性状主要存在野生的二倍体香蕉品种中，但绝大多数香蕉抗病性状的分子背景尚不清楚。小组同学认为还可以利用 技术将三倍体香蕉体细胞与二倍体香蕉体细胞进行融合培育抗病香蕉，该技术常用的化学诱导剂是 。
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目前栽培的主要香蕉品种是三倍体或多倍体,不结种子,因此无性繁殖成了主要种植方式.长期以来,香蕉生产遭受病害的严重威胁,制约了其发展.为提高其产量,某生物小组利用转基因技术培育抗病香蕉.培育过程如图所示:
(1)获得抗病基因后,常利用____________________技术进行扩增,该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成____________.该技术需要的酶是________________酶．
(2)将目的基因导入植物细胞常用的方法有多种,图中所示方法为________________.欲检测转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因,可采用________________________技术.
(3)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有________________________,作为标记基因.
(4)香蕉的抗病性状主要存在野生的二倍体香蕉品种中,但绝大多数香蕉抗病性状的分子背景尚不清楚.小组同学认为还可以利用________________________________技术将三倍体香蕉体细胞与二倍体香蕉体细胞进行融合培育抗病香蕉．
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（10分）长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________，对________进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有________ ，作为标记基因。
（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：________ (填字母序号)。
A启动子 B终止子 C 复制原点 D标记基因
（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为________ 。
（5）欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术________(填字母序号)。
A. 核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C. 抗原-抗体杂交 D. PCR
(6)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株。香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有________ 等植物激素，它们会在 ________（填图中标号）阶段发挥作用，同时________（填图中标号）阶段还需要给予一定光照。
（7）从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中，需经过 ________ 。(填数字)
①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④ 原代培养 ⑤ 传代培养
⑥ 植物体细胞杂交 ⑦ 细胞融合 ⑧ 脱分化 ⑨ 再分化
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长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展。目前，随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟，为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：___________，培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有___________，作为标记基因。
（2）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶___________，对含抗病基因的DNA和质粒进行切割。欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术______________________ 。目的基因能都在真核细胞中稳定遗传的关键是 。
（3）香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两个周。在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用。我们如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从
出发来设计预期的蛋白质结构，再推测应有的氨基酸序列。
（4）科学家把得到的抗病香蕉和耐储存的香蕉做成了人工种子，人工种子就是以植物组织培养得到的
等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。在其他方面，科学家历尽艰辛万苦把番茄和马铃薯融合在一起但并没有得到预期的结果，尽管如此，这项研究还是在 取得巨大的突破。
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野生的香蕉是二倍体，栽培的香蕉是三倍体，抗病性状主要存在于野生的香蕉中。科学家利用多种现代生物技术培育抗病品种。请回答以下问题：
（1）栽培的香蕉很难产生正常配子的原因是_____________________，所以传统杂交技术难以让栽培的香蕉获得抗病性状，但可通过___________、植物体细胞杂交、人工诱变等现代生物技术使其获得抗病性状。
（2）香蕉体细胞需要经过___________（过程）获得愈伤组织，由于愈伤组织___________，可利用物理或化学因素来处理使其发生基因突变，从而获得抗病性状。
（3）将三倍体和二倍体香蕉的体细胞用___________酶处理获得原生质体，在此过程中，除考虑酶的活性外，还需要考虑酶的___________和酶的___________等影响游离原生质体数量和活力的因素。将获得的原生质体用物理法或化学法诱导融合后，再生出___________，经植物组织培养即可获得具有抗病性状的杂种植株。
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马铃薯是一种“高性价比农作物”。2015年我国启动马铃薯主粮化战略，让马铃薯逐渐成为水稻、小麦、玉米外的又一主粮。但是目前生产上应用的马铃薯均为无性繁殖品种，连年种植产量降低。现采用植物细胞工程解决这一问题。
(l)植物细胞工程最基本技术的理论基础是____。
(2)研究人员常在热处理马铃薯母株后，剥离并接种 ___到培养基，经细胞的 ___过程形成脱毒苗。热处理温度(40℃)下并不能杀死病毒，但可以使马铃薯母株内的病毒____，失去传染能力。
(3)马铃薯幼苗是否脱毒可以使用____观察，检查是否有病毒粒子的存在；还可以运用____的方法，用已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类。
(4)利用植物细胞工程可以培育马铃薯新品种。用甲基磺酸乙酯对__进行处理，经诱导分化和筛选，可培育出抗病、高产的突变体。二倍体马铃薯野生种有许多优良基因，与四倍体栽培种很难杂交成功，可以通过_____技术，培育出六倍体新品种。
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无籽西瓜是目前栽培面积较广的西瓜品种，具有果实大、细胞内有机物的含量高及无籽等优异性状。下列有关叙述正确的是（ ）
A.无籽西瓜是经多倍体育种而成，原理是基因重组
B.无籽西瓜为三倍体，是不同于普通西瓜的新物种
C.无籽西瓜虽高度不育，但无籽性状属可遗传变异
D.无籽西瓜果实的发育需要三倍体西瓜花粉的刺激
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（12分）中国是世界上最大的茄子生产国，为培育优良品种，育种工作者应用了多种育种方法。请回答：
（1）茄子的早期栽培品种为二倍体，有人利用秋水仙素处理二倍体茄子的幼苗，选出四倍体茄子。其原理是：秋水仙素作用于正在分裂的植物细胞，会抑制________。的形成，导致________加倍。
（2）茄子晚开花（A）对早开花（a）为显性，果实颜色有深紫色（BB）、淡紫色（Bb）与白色（bb）之分，两对基因自由组合。为培育早开花深紫色果实的茄子，选择基因型 AABB与 aabb的植株为亲本杂交，F1 自交得到的 F2 中有________种表现型，其中早开花深紫色果实的植株应占________。
（3）青枯病是茄子的主要病害，抗青枯病（T）对易感青枯病（t）为显性，基因 Ｔ、t与控制开花期的基因 A、a自由组合。若采用二倍体早开花、易感青枯病茄子（aatt）与四倍体晚开花、抗青枯病茄子（AAAATTTT）为育种材料，运用杂交和花药离体培养的方法，培育出纯合的二倍体早开花、抗青枯病茄子，则主要步骤为：
①第一步：________。
②第二步：以基因型________的茄子为亲本杂交，得到 F1（AaTt）
③第三步：________（用遗传图解或文字简要描述）。
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（15分）中国是世界上最大的茄子生产国，为培育优良品种，育种工作者应用了多种育种方法。请回答：
（1）茄子的早期栽培品种为二倍体，有人利用秋水仙素处理二倍体茄子的幼苗，选育出四倍体茄子。其原理是：秋水仙素作用于正在分裂的植物细胞，会抑制＿＿＿＿的形成，导致＿＿＿＿＿＿＿＿加倍。
（2）茄子晚开花（A）对早开花（a）为显性，果实颜色有深紫色（BB）、淡紫色（Bb）与白色（bb）之分，两对基因自由组合。为培育早开花深紫色果实的茄子，选择基因型AABB与aabb的植株为亲本杂交，F1自交得到的F2中有＿＿种表现型，其中早开花深紫色果实的植株应占＿＿＿＿。
（3）青枯病是茄子的主要病害，抗青枯病（T）对易感青枯病（t）为显性，基因T、t与控制开花期的基因A、a自由组合。若采用二倍体早开花、易感青枯病茄子（aatt）与四倍体晚开花、抗青枯病茄子（AAAATTTT）为育种材料，运用杂交和花药离体培养的方法，培育出纯合的二倍体早开花、抗青枯病茄子，则主要步骤为：
①第一步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②第二步：以基因型＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的茄子为亲本杂交，得到F1（AaTt）。
③第三步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（用遗传图解或文字简要描述）。
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（10分）中国是世界上最大的茄子生产国，为培育优良品种，育种工作者应用了多种育种方法。请分析回答：
⑴茄子的早期栽培品种为二倍体，有人利用秋水仙素处理二倍体茄子的幼苗，选育出了四倍体茄子。其原理是秋水仙素作用于正在分裂的植物细胞，会抑制 的形成，导致________加倍。
⑵青枯病是茄子的主要病害，抗青枯病(T)对易感青枯病(t)为显性，基因T、t与控制开花期的基因A、a自由组合。若采用二倍体早开花、易感青枯病茄子(aatt)与四倍体晚开花、抗青枯病茄子(AAAATTTT)为育种材料，运用杂交和花药离体培养的方法，培育出纯合的二倍体早开花、抗青枯病茄子，其主要步骤：
①第一步：______________________________________________。
②第二步：以基因型为______________________的茄子为亲本杂交，得到F1(AaTt)。
③第三步：(用遗传图解或文字简要描述)。